酶联免疫底物MADB全称是N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐,是一种亲水性能好的过氧化物酶显色底物,它与4-AAP的显色产物最大吸收波长达到了630nm,受干扰的物质少,适合成分复杂的样品检测,例如用于酶光度法甘油三酯检测。
MADB是生化试剂盒中的一种原料,作为过氧化物酶的色原底物使用。酶光度法检测甘油三酯试剂盒中,在过氧化物酶存在下它能与4-AAP耦联氧化,甘油三酯经过一系列反应可产生过氧化氢氧化,能与MADB产生显色反应。
酶联免疫底物MADB用于酶法甘油三酯检测
甘油三酯检测原理:
检测过程中,甘油三酯在脂蛋白酯酶(LPL,脂蛋白脂肪酶)存在下首先水解成甘油和脂肪酸;甘油和腺苷三磷酸ATP在甘油激酶(GK)催化下生成甘油-3-磷酸和ADP;甘油-3-磷酸和氧在甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)催化下生成二羟丙酮磷酸和过氧化氢;生成的过氧化氢即可以使色原底物MADB和4-AAP发生耦联氧化,生成醌亚胺物质,然后就可以用分光光度计进行630nm处最大吸收波长的检测,分析方法通常采用比色终点法。
甘油三酯与脂蛋白的关系:
甘油三酯是甘油与3个脂肪酸形成的酯,是天然脂肪中含量最多的。在血液中,甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒,运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛,以检出致动脉粥样硬化的危险;监视降脂治疗的效果。近期的研究说明,甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白(LDL)的升高,特别对发生冠心病(CHD)具有高度危险。流行病学研究观察到,若同时出现血清甘油三酯>2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)<1.0mmol/L,说明未来发生冠心病(CHD)的危险性很高。甘油三酯临界值(>2.3mmol/L)的临床应用需结合CHD的其他危险因子。
酶联免疫分析是生化检测中应用非常广泛的方法,检测的底物包括MADB在内的新型Trinder’s试剂除了用于甘油三酯检测外,还能用于低密度脂蛋白检测或其它生化指标检测。德晟研发生产的底物不仅有MADB还有MAOS、TOOS、DA64等十多种。